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自動菌落計數儀檢樣稀釋及培養
更新時間:2020-01-15  |  點擊率:2085
     菌落總數是指食品經過處理,在一定條件下培養后,所得1 g或1 ml檢樣中所含細菌菌落總數。菌落總數主要作為判別食品被污染程度的標志,也可以應用這一方法觀察細菌在食品中繁殖的動態,以便對被檢樣品進行衛生學評價時提供依據。菌落總數并不表示樣品中實際存在的所有細菌總數,菌落總數并不能區分其中細菌的種類,所以有時被稱為雜菌數,需氧菌數等。
 
    自動菌落計數儀檢樣稀釋及培養
 
    1、以無菌操作,將檢樣25 g(或25 mL)剪碎以后,放于含有225 mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的滅菌玻璃瓶內(瓶內預先置適當數量的玻璃珠)或滅菌乳缽內,經充分振搖或研磨做成1:10的均勻稀釋液。固體檢樣在加入稀釋液后,置滅菌均質器中以8 000 r/min—1 0000 r/mln的速度處理1 min做成1:10的均勻稀釋液。
 
    2、用1 mL滅菌吸管吸取1:10稀釋液1 mL,沿管劈徐徐注入臺有9 mL滅菌生理鹽水或其他稀釋液的試管內(注意吸管不要觸及管內稀釋液,下同),振搖試管混合均勻,做成1:100的稀釋液。
 
    3、另取1 mL的滅菌吸管,按上項操作順序作10倍遞增稀釋液,如此每遞增稀釋一次,即換用1支1 mL滅菌吸管。
 
    4、根據食品衛生標準要求或對檢樣污染情況的估計,選擇2—3個適宜稀釋度,分別在作10倍遞增稀釋的同時,即以吸取該稀釋度的吸管移1mL稀釋液于滅菌平皿內,每個稀釋度作兩個平皿。
 
    5、稀釋液移入平皿后,應及時將涼至46℃營養瓊脂培養基[可放置在(45土1) ℃水浴鍋內保溫注入平皿15 mI一20 mL,并轉動平皿位混合均勻,同時將營養瓊脂培養基傾入加有1 mL稀釋液(不含樣品)的滅菌平皿內作空白對照。
 
    6、待瓊脂凝固后,翻轉平板,置(36土1) ℃恒溫箱內培養(48土2) h取出板內菌落數目,乘以稀釋倍數,即得I g(1 mL)樣品所含菌落總數。
 
    菌落計算方法
 
    1、平板菌落數的選擇
 
    選取菌落數在30一300之間的平板作為菌落總數測定標準。一個稀釋度使用兩個平板,選取兩個平扳平均數。其中一個平板有較大片狀菌落生長時。則不宜采用,而應以無片菌落生長的平板計數作為該稀釋度的菌落數。若片狀菌落不到平板的一半,而其余一半中菌落分布2 fB均勻,可計算半個平板后乘2 U代表整個平皿菌落數。
 
    2、稀釋度的選擇
 
    (1)應選擇平均菌落數在30一300之間的稀釋度,乘以稀釋倍效,報告之(見表5-2例1)。
 
    (2)若有兩個稀釋度,其生長的菌落數均在30一300之間,則視二者之比如何來決定。若其比值小應報告其平均數:若比值大于2,則報告其中較小的數字(見表5-2例2、例3)。
 
    (3)若所有稀釋度的平均菌落數均大于300,則應按稀釋度高的平均菌落數乘以稀釋倍數報告之(見表5-2例4)。
 
    (4)若所有稀釋度的平均菌落數均小于30,則應按稀釋度低的平均菌范數乘以稀釋倍數報告之(見表5-2例5)。
 
    (5)若所有稀釋度均無菌落生長,則以小于1乘以低稀釋倍數報告之〔見表5-2例6〕。
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